TNF-alpha Differentially Regulates Ghrelin Expression in Endometrial Cancer Cell Lines and Primary Cell Cultures

Abstract

Tumor necrosis factor-alpha (TNF) and Ghrelin exhibit autocrine and paracrine functions and are present in several tissues. Their biological effects have been observed in the endometrium under both normal and pathological conditions. This experiment was set out to determine whether TNF alpha changes ghrelin expression in primary endometrial cell culture and endometrial cancer cell lines. Endometrial tissue was taken after ethical permission from 25–40-year-old women who had gynecological surgery at Jessop Hospital, Sheffield, UK. TNF- alpha was added to cultivated Ishikawa and HEC1B endometrial cancer cell lines at 1,10 ng/ml. similar treatments were conducted to isolate primary endometrial epithelial and stromal cells. TNF-induced Ghrelin expression was evaluated by immunocytochemistry. TNF induced a concentration-dependent increase in immunostaining of ghrelin expression and apoptosis in endometrial cancer cell lines. Similarly, primary endometrial epithelial showed a concentration-dependent increase in the apoptotic appearance and ghrelin expression, whereas stromal cells did not demonstrate any detectable changes. TNF-alpha showed a Concentration-dependent effect on apoptotic appearance and ghrelin-expressing in endometrial cancer cell lines (Ishikawa, Hec1B cells) and epithelial cells but not in stromal cells. This finding points to TNF-alpha’s intricate influence on the biology and reproduction of the endometrium. Further in vivo quantitative assessments for endometrial expression of ghrelin peptide, mRNA, and the related molecular aspects for these endometrial effects are needed.

عامل النخر الورمي ألفا والغريلين لديهما وظائف ذاتية الافراز وموضعية التأثير (نظير صماوي)، ويوجد كل منهما في عدة انسجة، وقد تم رصد تأثيرهم البيولوجي في الحالات الطبيعية والمرضية لبطانة الرحم. الهدف: تم اجراء هذه التجربة لتحديد إذا ما كان عامل النخر الورمي الفا له تأثير على تعبير القريلين في خطوط الخلايا الأولية وخطوط الخلايا السرطانية لبطانة الرحم. المواد والطرق: تم اخد عينات انسجة بطانة الرحم بعد الموافقة الأخلاقية من نساء تتراوح أعمارهم من 25 الي 40 عاما واللائي خضعن لجراحة نسائية في Jessop Hospital, Sheffield, UK  . تم إضافة عامل النخر الورمي الفا لخطوط الخلايا السرطانية لبطانة الرحم ((Ishikawa, Hec1B cells بتركيز 1 و 10 نانوجرام \ مل . نفس المعاملة السابقة تم اجراؤها على الخلايا الطلائية والسدوية الأولية المعزولة من عينات بطانة الرحم وتم تقييم التغييرات المستحدثة بإضافة عامل النخر الورمي الفا على تعبير القريلين باستخدام كيمياء المناعة الخلوية. النتائج: أدت المعاملة بعامل النخر الورمي الفا الي زيادة معتمدة علي التركيز في صفات الموت الخلوي وكذلك في التعبير عن القريلين في خطوط خلايا سرطان بطانة الرحم ((Ishikawa, Hec1B . وبالمثل؛ أظهرت الخلايا الطلائية الأولية لبطانة الرحم زيادة معتمدة على التركيز في مظاهر الموت الخلوي وتعبير القريلين. بينما لم تظهر الخلايا السدوية لبطانة الرحم أي تغيير ملحوظ.  الاستنتاج: عامل النخر الورمي الفا لديه تأثير  يعتمد علي التركيز في ظهور الخلايا المبرمجة للموت و أيضا في تعبير القريلين في خطوط خلا سرطان بطانة الرحم ((Ishikawa, Hec1B cells والخلايا الطلائية ولكن ليس في الخلايا اللحمية لبطانة الرحم. تشير هذه النتائج الي التأثير البيولوجي المعقد لعامل النخر الفا على وظيفة بطانة الرحم والتكاثر. هناك حاجة الي دراسات اخري تجري في الجسم الحي لتقييم تأثير عامل النخر الفا على تعبير القريلين وكذلك فهم الالية الجزيئية المرتبطة بهذا التأثير